Caracterización clínico epidemiológica del parasitismo intestinal en pacientes jóvenes / Clinical epidemiological characterization of intestinal parasitism in young patients

Introducción: entre las enfermedades infecciosas, las producidas por parásitos intestinales constituyen un importante problema de salud para el hombre. Objetivo: caracterizar clínica y epidemiológicamente el parasitismo intestinal en pacientes jóvenes. Métodos: se realizó un estudio observacional, descriptivo y transversal en la consulta externa del Hospital Militar Docente Dr Mario Muñoz Monroy; el universo de estudio estuvo representado por todos los pacientes jóvenesa tendidos durante el período de noviembre de 2013 a octubre de 2014 con el diagnóstico clínico y microbiológico de parasitosis intestinal. Resultados: existió un predominio del sexo masculino con un 91 por ciento, siendo el grupo etario más afectado el de 17 a 22 años para un 60,7 por ciento. El 19,6 por ciento de los enfermos procedían del municipio Calimete. El dolor abdominal, seguido de las diarreas fueron los síntomas más referidos por los pacientes para un 96,4 por ciento y 94,6 por ciento, respectivamente. La Giardia lamblia fue el parásito más identificado en las muestras con un 51,7 por ciento, seguido del Enterobius vermicularis en un 28,6 por ciento. La mayoría de los enfermos no acostumbra a lavar los alimentos antes de su ingestión en un 83,9 por ciento de los casos estudiados, ni practican el lavado de manos previo representando el 69,6 por ciento. Conclusiones: el mayor porcentaje de pacientes enfermos procede del área rural. Los malos hábitos higiénicos-dietéticos constituyen los principales factores de riesgo(AU)

Introduction: Among the infectious diseases, those produced by intestinal parasites are a major health problem. Objective: To characterize the clinical and epidemiological aspects of intestinal parasitism in young patients. Methods: An observational, descriptive and cross-sectional study was carried out in the external consultation of the Military Teaching Hospital Dr Mario Muñoz Monroy; the universe was represented by all the young patients treated from November 2013 to October 2014 with the clinical and microbiological diagnosis of intestinal parasitosis. Results: There was a predominance of males with 91 percent, the most affected age group being 17 to 22 years old for 60.7 percent. 19.6 percent of the patients came from Calimete municipality. Abdominal pain and diarrhea were the most commonly reported symptoms for 96.4 percent and 94.6 percent, respectively. Giardia lamblia was the most identified parasite in the samples with 51.7 percent, followed by Enterobius vermicularis in 28.6 percent. The majority of patients do not usually wash their food prior to their ingestion in 83.9 percent of the cases, nor do they practice previous hand washing, representing 69.6 percent. Conclusions: The highest percentage of sick patients comes from the rural area. Bad hygienic-dietary habits are the main risk factors(AU)

Caracterização dos mecanismos de microvesiculação de trofozoítos de Giardia intestinalis e determinação do papel das microvesículas na interação com células hospedeiras / Characterization of microvesiculation mechanisms of Giardia instestinalis trophozoites and determination of the microvesicles role in the interaction with host cells

Giardia intestinalis (G. intestinalis) é o parasita gastrointestinal mais comum que coloniza o trato intestinal humano onde permanece extracelular e aderido às células intestinais. O parasita tem uma distribuição mundial, causando um número estimado de 2.8x108 casos por ano e recentemente a doença foi incluída como parte da Iniciativa das Doenças Negligenciadas da Organização Mundial de Saúde. As manifestações clínicas da giardíase são variáveis, e vão desde a ausência de sintomas até diarreias agudas ou crônicas. Adicionalmente, estudos recentes indicam que distúrbios gastrintestinais funcionais, tais como a síndrome do intestino irritável, e o déficit de crescimento em crianças podem ser associados com a infecção por G. intestinalis. Apesar da alta prevalência e das consequências desta doença, os mecanismos fisiopatológicos subjacentes na giardíase ainda permanecem incompreendidos. Os trofozoítos causam a doença sem penetrar no epitélio intestinal, nem entrar na corrente sanguínea e sem secretar nenhuma toxina conhecida. Nos últimos anos, tem sido descrito que as vesículas extracelulares podem participar na interação parasita-célula hospedeira. As vesículas extracelulares podem ser: microvesículas (MVs) e derivadas da membrana plasmática; exosomos, pequenas vesículas originadas a partir de membranas de endossomos; e corpos apoptóticos contendo material do núcleo celular. As MVs têm sido mostradas como importantes fatores na interação parasita-célula hospedeiraNo presente trabalho, foi utilizada uma combinação de metodologias, incluindo citometria de fluxo, microscopia de fluorescência, proliferação celular, análises de proteoma e ensaios de aderência celular para investigar o papel das microvesículas liberadas por trofozoítos de G. intestinalis nas propriedades patogênicas deste parasita.

Demonstramos que G. intestinalis produz e secreta microvesículas com exposição superficial de fosfatidilserina. Além disso, o processo de liberação de MVs é dependente do tempo e da concentração de cálcio, envolve microdomínios de membrana e as microvesículas contêm RNA de baixo peso molecular. Observamos também que os microdomínios de membrana estão envolvidos na adesão do parasita à células Caco-2. Nossa análise proteômica preliminar sugere presença de componentes do citoesqueleto, alfa giardinas, enzimas metabólicas e proteínas variáveis de xi superfície (VSP) nas MVs isoladas de G. intestinalis. Foi demonstrado também que as MVs de G. intestinalis interagem com as células do hospedeiro aumentando a proliferação destas e incrementado também o número de trofozóitos aderidas à estas células. O presente estudo é o primeiro a sugerir um papel potencial para as microvesículas de G. intestinalis na colonização do hospedeiro. Uma melhor compreensão do papel das MVs liberadas pelo parasita na interação com a célula hospedeira poderá fornecer novas perspectivas sobre patogênese e possivelmente novas ferramentas para o diagnóstico e a terapia da doença.

Giardia intestinalis (G. intestinalis) is the most common gastrointestinal parasite thatcolonizes the human intestinal tract where it remains extracellular and adheres to intestinalcells. The parasite has a global distribution causing an estimated 2.8x108cases per year andthe illness was recently included in the World Health Organization Neglected DiseaseInitiative. Clinical manifestations of giardiasis are quite variable, and range from the absenceof symptoms to acute or chronic diarrhea. Aditionally, recent studies indicate that functionalgastrointestinal disorders, such as irritable bowel syndrome, and failure of children to thrivecan be associated with G. intestinalis infection. Even though the high prevalence andconsequences of this disease, pathophysiological mechanisms underlying symptomaticgiardiasis remain incompletely understood. Trophozoites cause disease without penetratingthe intestinal epithelium, entering the bloodstream or secreting toxins. In recent years it hasbeen described that extracellular vesicles could participate in parasite-host cell interaction.The extracellular vesicles may be: microvesicles (MVs) and derived from the plasmamembrane; exosomes, small vesicles originated from endosomal limiting membrane; andapoptotic bodies containing nuclear material. MVs have been shown to be important factors inthe parasite-host cell interaction. Here, we used a combination of methodologies includingflow cytometry, fluorescence microscopy, cell proliferation, proteomics analysis and celladherence assays to investigate the role of released microvesicles from G. intestinalistrophozoites on the pathogenic properties of this parasite.

We have found that G. intestinalisproduces and secretes microvesicles with superficial exposition of phosphatidilserine.Additionally, the shedding process was calcium and time-dependent, involves membranemicrodomains and the microvesicles contain low-molecular weight RNA. We also observedthat membrane microdomains are involved in parasite attachment to Caco-2 cells. Ourpreliminary proteomic analysis suggested the presence of cytoskeleton components, alphagiardins, metabolic enzymes and variant-specific surface protein (VSP) in the isolated MVsfrom G. intestinalis. We demonstrate that G. intestinalis microvesicles interact with host cellsxiiiincreasing their proliferation and augmenting the number of trophozoites adhered to thesecells. The present study is the first to suggest a potential role for G. intestinalis microvesiclesin host cell colonization. A better understanding of the role of the released microvesicles bythe parasite on the host-cell interaction will provide insights into pathogenesis and possiblynew tools for diagnosis and therapy.